Medicina molecular y genética

Las mutaciones en PRPF31 se han relacionado con la retinitis pigmentosa, una enfermedad que produce ceguera y que se produce por la degeneración de los fotorreceptores de bastón. El mecanismo de la enfermedad en la mayoría de los casos es la haploinsuficiencia. Fundamentalmente, los intentos de generar modelos animales de la enfermedad han resultado infructuosos, obteniéndose animales con un fenotipo visual que no refleja la enfermedad humana. Esto sugiere que, en estos animales, la regulación transcripcional de PRPF31 es diferente a la de los humanos y en comparación con otras especies. El estudio de la evolución del promotor central de PRPF31 tiene implicaciones importantes para nuestra comprensión de la enfermedad humana, ya que el fenotipo de la enfermedad se modifica por alelos expresados ??diferencialmente en la población.

El PRPF31 se encuentra en una disposición de cabeza a cabeza con el TFPT, un gen involucrado en la apoptosis celular. Se demostró que los dos genes comparten elementos reguladores comunes en el genoma humano. En este estudio, los promotores centrales del PRPF31 y del TFPT se caracterizaron mediante un ensayo de doble luciferasa usando ADN genómico del mono verde, el perro doméstico y el ratón doméstico. Se descubrió que los promotores centrales se conservaban entre el ser humano y el mono.

En el perro, el promotor central TFPT estaba conservado, pero la diferente arquitectura del gen PRPF31 significaba que el gen estaba controlado por un promotor de largo alcance ubicado a unos 2000 pb del sitio de inicio de la transcripción.

Se observó un nivel muy bajo de conservación (<20%) de la región 5' de PRPF31 entre ratones y humanos. Se demostró que las poblaciones de ratones no mostraron niveles variables de expresión de Prpf31, lo que revela una posible explicación de la falta de fenotipo observada en el modelo de ratón knock-out de Prpf31.

La homeostasis ósea se mantiene mediante un delicado equilibrio entre la formación ósea osteoblástica y la resorción ósea osteoclástica. La pérdida ósea puede deberse a una menor formación ósea osteoblástica y a un aumento de la resorción ósea osteoclástica. La osteoporosis se induce con la consiguiente disminución de la masa ósea. La nutrición y los factores alimentarios funcionales pueden desempeñar un papel en la prevención de la pérdida ósea. Esto es digno de mención en el tratamiento de la osteoporosis. Se ha demostrado que los factores alimentarios funcionales, incluidos el zinc, la genisteína y la vitamina K2 (menaquinona-7), tienen posibles efectos osteogénicos in vitro e in vivo. Se ha demostrado que estos factores tienen efectos estimulantes sobre la formación ósea osteoblástica y efectos supresores sobre la resorción ósea osteoclástica. Además, se ha descubierto que los efectos osteogénicos de la genisteína, la menaquinona-7 y la vitamina D3 se mejoran sinérgicamente con la combinación de zinc, que desempeña un papel esencial en la síntesis de proteínas en el proceso de traducción y la expresión génica relacionada con los factores de transcripción de dedos de zinc. Se ha demostrado que la ingesta de su combinación tiene efectos potenciales en el tratamiento de la pérdida ósea en modelos animales de osteoporosis y sujetos humanos. La ingesta complementaria con estas composiciones puede tener efectos potenciales en el tratamiento de la osteoporosis.

La hipertensión inducida por el embarazo (HIE) es una de las principales causas de mortalidad materna. El perfil lipídico sérico desempeña un papel fundamental en la regulación de la presión arterial normal durante el embarazo. El objetivo de nuestro estudio fue evaluar la alteración del perfil lipídico sérico durante el embarazo normotenso e hipertenso. Este estudio de casos y controles se realizó entre las mujeres embarazadas que visitaron el Hospital Jinnah de Lahore, Pakistán, desde septiembre de 2012 hasta marzo de 2013. Se evaluó a un total de 200 participantes, de las cuales 50 eran mujeres embarazadas normotensas (28 ± 8 años) tomadas como grupo de control normal y 150 se inscribieron como grupo de estudio hipertensas (30 ± 6 años). La presión arterial promedio para las mujeres embarazadas normotensas fue de 115/75, mientras que para las mujeres embarazadas hipertensas fue de 148,45/95,40. Los niveles de diferentes lípidos séricos se midieron utilizando los respectivos kits analíticos. La hipertensión se asoció directamente con mayores niveles séricos de TG (161,02 ± 3,58 vs. 105,31 ± 8,53), TC (188,90 ± 4,11 vs. 152,45 ± 1,99), LDL (136,50 ± 3,17 vs. 70,48 ± 2,14) y VLDL (117,06 ± 1,05 vs. 41,06 ± 1,70), y caída en HDL (49,41 ± 1,56 vs. 37,16 ± 1,64) en comparación con las mujeres embarazadas normotensas. Los niveles elevados de TG, CT y LDL en embarazadas hipertensas también se correlacionaron con valores significativamente elevados de TC/HDL, TG/HDL y LDL/HDL en embarazadas hipertensas. A partir de los resultados de nuestro estudio, se puede concluir que el perfil lipídico desempeña un papel fundamental en la regulación de la presión arterial durante el embarazo. Los niveles elevados de TC, TG, LDL y VLDL indujeron hipertensión, mientras que el HDL reguló la presión arterial a niveles normales. Esta asociación puede ser importante para comprender el desarrollo de la hipertensión durante el embarazo y puede ayudar a desarrollar estrategias para la prevención y el tratamiento de la HIP.

Investigamos la presencia de genes asociados con la producción de carbapenemasas que hidrolizan carbapenem en aislados de Klebsiella pneumoniae recuperados de pacientes de la UCI. Se realizó una prueba de susceptibilidad antimicrobiana y se caracterizaron los genes de resistencia mediante amplificación y secuenciación por PCR. Se realizaron la prueba de Hodge modificada (MHT), la prueba MBL E, el método de difusión en disco combinado con EDTA y ácido aminofenilborónico (APBA) y un ensayo enzimático en disco para la detección de carbapenemasas. Las CMI de los carbapenems fueron las siguientes (mg/L) ertapenem 8, meropenem 1, imipenem 0,25 y doripenem 0,5. El aislado demostró resultados positivos en las pruebas combinadas de ESBL, EDTA y APBA y en el ensayo enzimático en disco. La PCR y la secuenciación revelaron la presencia de los genes de beta-lactamasa bla _OXA-51 y bla _CTX-M-15 . Los plásmidos no se transfirieron a la E. coli receptora mediante conjugación y transformación. En conclusión, informamos sobre la primera detección del aislado de K. pneumoniae que contiene OXA-51 y coprodujo una β-lactamasa CTX-M-15.

Antecedentes y objetivos: La infección por Helicobacter pylori (H. pylori) tiene consecuencias graves, como úlceras pépticas y cáncer gástrico. La identificación histológica de los organismos sigue siendo el estándar de oro en el diagnóstico de H. pylori. Este metanálisis revisó la precisión diagnóstica general de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) frente a la histología de la infección por H. pylori en pacientes con otitis media serosa (OME).

Métodos: Se realizaron búsquedas sistemáticas en Medline, Scopus e ISI Web of Science. Se recuperaron los artículos que cumplían los criterios de selección para la recopilación y el análisis de datos. Se calculó la razón de posibilidades diagnóstica (DOR) y la característica operativa del receptor resumida simétrica (sROC) de la infección por H. pylori asociada a OME para cada estudio. Las técnicas de PCR se compararon con las pruebas histológicas como el estándar de oro para el diagnóstico de la infección por H. pylori.

Resultados: Se incluyeron ocho estudios relevantes que comprendían 259 casos de OME. La sensibilidad y especificidad agrupadas de la PCR en comparación con el diagnóstico histológico de la infección por H. Pylori en pacientes con OME fueron del 71% (IC del 95%: 61% - 80%, I2: 0,0%) y del 81% (IC del 95%: 76% - 86%, I2: 59,9%), respectivamente. La razón de verosimilitud positiva (PLR) y la razón de verosimilitud negativa (NLR) agrupadas para la PCR fueron de 3,61 (IC del 95%: 2,34 – 5,59, I2: 44,5%) y de 0,42 (IC del 95%: 0,31 – 0,57, I2: 0,1%), respectivamente. Para el análisis DOR, la precisión agrupada de la PCR fue de 10,78 (IC del 95 %: 5,95 – 19,53, I2: 0,0 %) para diagnosticar la infección por H. Pylori.

Conclusiones: Esta revisión mostró diferencias estadísticamente significativas en la precisión diagnóstica entre las pruebas PCR y las pruebas histológicas. Este metanálisis también sugiere una mayor sensibilidad y especificidad del diagnóstico molecular basado en PCR de la infección por H. Pylori en pacientes con OME en comparación con las pruebas histológicas.

Este estudio investigó la asociación de las variantes del número de copias (CNV) en la diabetes tipo 2 (DT2) y la enfermedad renal en etapa terminal (ESRD) asociada a la DT2 en afroamericanos. Utilizando la matriz Affymetrix 6.0, se interrogaron más de 900.000 sondas CNV que abarcaban el genoma en 965 afroamericanos con DT2-ESRD y 1029 controles afroamericanos no diabéticos. Las CNV previamente identificadas y las nuevas se analizaron por separado y se evaluaron para determinar el estado de inserción/deleción y luego se usaron como predictores en un modelo de regresión logística para probar la asociación. Una inserción común de CNV en el cromosoma 1 se asoció significativamente con DT2-ESRD (p = 6,17 × 10-5, OR = 1,63) después de la corrección de comparación múltiple. Esta región CNV abarca los genes AMY2A y AMY2B, que codifican isoenzimas de amilasa producidas por el páncreas. También se detectaron CNV adicionales comunes y novedosos que se acercaban a la significación con la enfermedad. Estos resultados exploratorios requieren una mayor replicación, pero sugieren la participación de la CNV AMY2A/AMY2B en la diabetes tipo 2 y/o la enfermedad renal terminal con diabetes tipo 2, e indican que las CNV pueden contribuir a la susceptibilidad a estas enfermedades.

El papel de la inflamación en la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer (EA) ha sido un tema de debate desde el comienzo de la investigación de la EA en 1907. Durante las últimas tres décadas, los estudios inmunohistoquímicos demostraron que las placas amiloides están co-localizadas con microglia activada, así como un amplio espectro de proteínas relacionadas con la inflamación (factores del complemento, proteínas de fase aguda, citocinas proinflamatorias) impulsando la hipótesis de que las placas amiloides pueden beneficiarse de reacciones inflamatorias no mediadas por el sistema inmunitario inducidas por depósitos fibrilares de Aβ. Sin embargo, los estudios moleculares también sugieren que las proteínas relacionadas con la inflamación están involucradas en la generación y eliminación de Aβ, la gliosis y el aumento de la fosforilación de tau con la formación acelerada de ovillos, es decir, varios eventos considerados pasos patogénicos clave en la EA. En consonancia con ambas nociones, los estudios neuropatológicos muestran una estrecha relación entre los depósitos fibrilares de Aβ, la inflamación y la neuroregeneración en etapas relativamente tempranas que preceden a cambios neurofibrilares extensos relacionados con tau. Los estudios genéticos abordan la cuestión de la causalidad inversa y, por lo tanto, pueden ayudar a aclarar la relación temporal entre los cambios inflamatorios y la enfermedad de Alzheimer. En este artículo de revisión, resumimos los hallazgos sobre los genes inflamatorios de los estudios genéticos a gran escala en la enfermedad de Alzheimer y analizamos las direcciones para futuras investigaciones.

Cystic fibrosis (CF) is an autosomal recessive disease caused by more than 1,900 mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) gene. In CF, one intriguing aspect is that patients, with same CFTR mutation, can have high clinical variability. Thus, the CFTR genotype does not seem to be the only determining factor in the clinical severity modulation. Therefore, the modifier genes and the environment must be considered. The IFRD1 (Interferon-related developmental regulator 1) gene, acts on the immune system and in the recruitment of immune cells, and consequently could be a modulator. In our data we included 88 CF patients, diagnosed by CFTR mutation screening and positive sweat test. The 57460C>T polymorphism screening in the IFRD1 gene was made by polymerase chain reaction associated to enzymatic digestion. A genotypic comparison was performed with 23 CF clinical variables. The data was analyzed by the SPSS program considering α=0.05. The patients were analyzed considering the CFTR genotype characteristic by mutation class. In our data 64.77% of patients had mutations of classes I, II or III in the CFTR gene. The IFRD1 polymorphism frequency was 28 (12.99%), 35 (75.32%) and 25 (11.69%) to the CC, CT and TT genotypes, respectively. In our study, the 57460C>T polymorphism in the IFRD1 gene was not associated with the CF clinical variables. The analysis was performed with and without consideration of the CFTR genotype, and after correction for multiple testing (Bonferroni test), no positive association was observed in both cases. Taking into account our results, in the CF patients population analyzed, there were no associations of the 57460C>T polymorphism in the IFRD1 gene with the CF clinical variables.