Medicina molecular y genética

La creciente prevalencia de la diabetes tipo 2 (DT2) subraya la necesidad urgente de estrategias proactivas para prevenir y controlar la DT2. Un número bastante grande de estudios muestra que la DT2 es una enfermedad metabólica compleja causada por el estilo de vida, el medio ambiente y factores genéticos. Por lo tanto, el estudio de una predisposición genética a la diabetes es de gran importancia. Al mismo tiempo, uno de los métodos más eficaces, además de las investigaciones de todo el genoma, es el uso de marcadores polimórficos de varios genes candidatos, es decir, aquellos genes cuyos productos proteicos (enzimas, proteínas reguladoras y péptidos, proteínas estructurales) pueden estar potencialmente involucrados en el desarrollo de esta enfermedad. El estudio de los marcadores genéticos asociados con la diabetes tipo 2 es relevante en todo el mundo. El objetivo de este estudio fue buscar marcadores genéticos asociados con el desarrollo de la DT2 en individuos de la población kazaja.

Introducción: El mosaicismo cromosómico se caracteriza por la presencia de más de una línea celular cromosómicamente diferente en un individuo. El mosaicismo cromosómico preimplantacional se caracteriza por la presencia de una mezcla de líneas celulares cromosómicamente diferentes en un embrión. Los estudios muestran que el mosaicismo de cromosomas completos (aneuploidías) en una o más células (blastómeros) ocurrió en más del 75% de los embriones en etapa de segmentación, mientras que entre el 3% y el 24% de los embriones en etapa de blastocisto son cromosómicamente mosaicos.

Objetivo: El propósito de este estudio fue estandarizar y validar un método de secuenciación de próxima generación (NGS) para realizar pruebas cromosómicas integrales para detectar aneuploidías y estudiar el nivel de mosaicismo en embriones en etapa de segmentación frente a embriones en etapa de blastocisto.

Métodos: La validación implicó una evaluación ciega retrospectiva de los productos de amplificación del genoma completo (WGA) de 14 biopsias de embriones en etapa de clivaje (blastómeros), 6 biopsias de embriones en etapa de blastocisto (TE), además de sus 20 embriones completos descartados en etapa de blastocisto. El 42,8% de los embriones en etapa de clivaje mostraron mosaicismo, mientras que los resultados entre las biopsias de trofectodermo (TEB) y sus embriones completos en etapa de blastocisto mostraron concordancia total ya que no se observó mosaicismo. Se encontró que la sensibilidad y especificidad de NGS para determinar la aneuploidía fue del 100%.

Conclusión: Este es el primer estudio que informa sobre la validación preclínica y la evaluación de la precisión de la tecnología de secuenciación de semiconductores iónicos en el estudio del nivel de mosaicismo en embriones en etapa de clivaje y biopsias TE en etapa de blastocisto frente a sus embriones completos.

El alto nivel de mosaicismo en los embriones en etapa de segmentación en comparación con los embriones en etapa de blastocisto no recomienda la realización de PGT-A en embriones en etapa de segmentación. La NGS demostró ser una metodología robusta en la aplicación clínica de PGT-A.

Background: Glucocorticoid-induced diabetes mellitus (GIDM) is a serious side effect of glucocorticoid (GC) treatment that is associated with both increased mortality and morbidity, but not all patients develop GIDM when treated with GC. The reason is not known, and clinical risk factors predictive of type 2 diabetes do not predict GIDM. Previous metabolomics studies have found specific metabolic disturbances prior to clinical type 2 diabetes. This could also be true for GIDM. The primary aim of this study was to investigate whether distinct metabolic patterns in patients treated with high dose GC can predict development of GIDM.
Material and Methods: Serum from 116 patients about to be treated with or in the first days of treatment with high-dose GC (>100 mg prednisolone equivalent) was analyzed with liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) based nontargeted metabolomics. Clinical data were collected at baseline and through a 3-week follow-up period. 52 patients developed GIDM and 64 did not (control group). A logistic regression model and a predictive model was build and differences in the metabolome due to treatment with GC was tested in serum from patients without GC treatment (n=6) and patients with GC treatment (n=107).
Results and Discussion: At univariate analysis three metabolites were associated with the development of GIDM. These metabolites could not be annotated to specific metabolites. A multi-metabolite approach could not predict GIDM, and this is different from previous findings in T2DM. This supports the hypothesis that the etiology of T2DM and GIDM is different. The biological significance of our finding remains unknown, but with the rapid development in the field of metabolomics and databases with increasing numbers of characterized metabolites, these metabolites may be identified. Conclusion: Our data indicate that the typical metabolic shifts in T2DM are not the same in GIDM. This supports the hypothesis that GIDM may have a pathophysiology different from T2DM. Furthermore, our data suggest that there is potential for identifying patients at risk of GIDM before clinical manifestation.

Objetivo: El objetivo de este estudio fue investigar los factores implicados en la disposición de micofenolato de mofetilo (MMF) en el riesgo de diarrea en niños con trasplante renal.

Métodos: Se exploraron las características de los pacientes, la inmunosupresión y los polimorfismos de los genes UGT1A8, UGT1A9, UGT2B7, ABCC2, IMPDH1 e IMPDH2 . Se realizaron análisis estadísticos mediante regresión logística.

Resultados: Se incluyeron 83 pacientes con trasplante renal y 28/83 (33%) desarrollaron diarrea que requirió la interrupción del MMF o el cambio a la formulación con cubierta entérica EC-MPS durante el seguimiento. En el análisis multivariable, el riesgo de diarrea fue significativamente mayor en pacientes con el gen ABCC2-24CC de tipo salvaje que portaban la variante IMPDH2 IVS7 + 10 T>C.

Conclusión: IMPDH2 (IVS7+10T>C) y ABCC2 (c.-24C>T) son biomarcadores asociados con diarrea en niños tratados con MMF.

Bacillus subtilis ( B. subtilis ) es un sistema huésped ideal para la producción de proteínas homólogas. Sin embargo, la producción de proteínas heterólogas en B. subtilis es poco frecuente debido a los bajos niveles de expresión que se encuentran en la mayoría de los casos. Las inteínas, también conocidas como "intrones proteicos", que son capaces de separarse de sus parejas de fusión, se han empleado para la expresión de proteínas recombinantes en varios sistemas huéspedes, especialmente en Escherichia coli ( E. coli ), pero, sin embargo, se ha encontrado una escasez de empleo de inteínas para la expresión de proteínas en B. subtilis . En esta comunicación, demostramos que B. subtilis fue capaz de facilitar las autoescisiones entre inteína y C-exteína. Se demostró que el constructo pECBS1-H6-DnaE-bFGF, en el que se fusionaron una etiqueta 6x His (H6) y un factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) en los extremos N y C de Asp DnaE (inteína) respectivamente, es capaz de procesar la expresión intracelular y las autoescisiones de bFGF con la misma secuencia primaria que el Homo Sapiens . Además, cambiar el cultivo en matraz agitado a una pequeña escala fermentativa produjo 113 mg L ^-1 de bFGF biológicamente activo. Este enfoque de utilizar inteína Asp DnaE para la producción de proteínas heterólogas es altamente productivo y debería explorarse más a fondo para su aplicación industrial.