Inmunoquímica e inmunopatología

Incertidumbre de medición para ELISA en un laboratorio de pruebas serológicas

Abstract

Subrata Biswas y el malayo Kumar Saha

Antecedentes: Los resultados analíticos que estiman la incertidumbre de medición (UM) indican el nivel de confianza del ensayo en cuestión. El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es una herramienta importante ampliamente utilizada para el serodiagnóstico de enfermedades infecciosas; sin embargo, no se informa la UM para el resultado de ELISA porque el procedimiento de estimación de la UM apenas está disponible. La Organización Internacional de Normalización (ISO) proporciona la Guía para la expresión de la incertidumbre en la medición (GUM) que describe un conjunto de pautas, sin embargo, no se describen procedimientos detallados ni instrucciones para evaluar procesos de medición específicos. Este artículo tiene como objetivo el procedimiento paso a paso para la estimación de la UM en un laboratorio de serología describiendo las posibles fuentes de incertidumbre durante cada paso de ELISA.

Métodos: La muestra de VIH se analizó mediante ELISA comercial siguiendo el procedimiento de rutina. La incertidumbre se estimó mediante la especificación del mensurando, la identificación de las fuentes de incertidumbre, la cuantificación de los valores atribuidos a las fuentes de incertidumbre y el cálculo de la incertidumbre estándar combinada siguiendo la GUM convirtiendo todas las incertidumbres estándar de ELISA en incertidumbres estándar relativas adimensionales. La incertidumbre estándar combinada se calculó utilizando el principio de propagación

Resultados: La incertidumbre derivada del error sistemático (RSD 0,10966) y la imprecisión analítica rutinaria (RSD 0,04938) se consideraron fuentes de incertidumbre que contribuyen a la IM total de este método de diagnóstico cualitativo rutinario. El análisis de los datos reveló que los resultados obtenidos para la incertidumbre expandida relativa U _rel fueron del 24% con un nivel de confianza del 95% (k=2).

Conclusión: La cuantificación de la incertidumbre mediante la combinación del error sistemático y la imprecisión analítica parece un método viable de cuantificación de la incertidumbre para ELISA. La incertidumbre estimada refleja el grado de variación de la absorbancia de corte para un resultado equívoco de la interpretación cualitativa.