Ciencia y terapia del cáncer

Efectos de UCH-L3 sobre el comportamiento biológico del cáncer de mama: correlación con las expresiones de HIF-1α

Abstract

Yang Zheng, Jinlong Zhong, Guojing Ren, Wei Sun, Jing Wu, Qirong Li, Yue Zhang, Jing Zhao, Hai Ling, Yingxu Shi, Gaowa Share, Xiaoyan Xu, Hua Du y Yonghong Shi

Proyectivo: HIF-1α se expresa en gran medida en la línea celular de cáncer de mama triple negativo (MDA-MB-231), que carece de la expresión de ER, PR y HER2 y exhibe una alta capacidad invasiva y metastásica. Un estudio previo detectó que el siRNA dirigido a HIF-1α en MDA-MB-231 restringió el crecimiento celular y las capacidades de inmigración e invasión, y promovió la apoptosis. Se encontró que la proteína UCH-L3 era una de las proteínas diferenciales detectadas por electroforesis en gel bidireccional y proteómica en las células con siRNA de HIF-1α en comparación con las células sin siRNA. El objetivo de este estudio es investigar el efecto de UCH-L3 en los comportamientos biológicos de la línea celular de cáncer de mama triple negativo (MDA-MB-231).
Métodos: Se establecieron sobreexpresiones o bloqueos de UCH-L3 mediante las transfecciones con vector constitutivo lentiviral y siRNA dirigido a UCH-L3 respectivamente. Se utilizaron PCR cuantitativa en tiempo real y Western blot o Co-ip para detectar el ARNm y las proteínas. CCK8 y ensayos de formación de clones se utilizaron para evaluar el crecimiento celular y la clonalidad. Matrigel Transwell y Would Scratch assay se utilizaron para estimar la invasión y movilidad celular.
Resultados: La sobreexpresión de UCH-L3 inhibió el crecimiento celular y la clonalidad, debilitó las capacidades de inmigración e invasión celular y redujo la expresión de HIF-1α libre y ubiquitinado en células MDA-MB-231 con vector lentiviral en comparación con las células con vector de control. La aplicación del inhibidor de enzima proteolítica, MG132 aumentó el nivel de proteína de UCH-L3 pero aún disminuyó el nivel de proteína de HIF-1α en las células con sobreexpresión de UCH-L3 . El bloqueo de la expresión de UCH-L3 mediante la técnica de ARNi aumentó la expresión de HIF-1α adecuadamente.
Conclusión: la alta expresión de UCH-L3 mostró un efecto inhibitorio sobre los comportamientos biológicos de las células de cáncer de mama triple negativo y un efecto negativo sobre la expresión de HIF-1α, lo que implica que UCH-L3 probablemente sea una estrategia terapéutica para el cáncer de mama triple negativo.