Inmunoquímica e inmunopatología

Desarrollo y aplicación de ELISA para ácido 3-indol-butírico

Abstract

Eline P. Meulenberg

El ácido indol-3-butírico (AIB) es una hormona de crecimiento vegetal que se utiliza para mejorar la formación de raíces durante el cultivo de esquejes en invernadero. Según las nuevas regulaciones de la CE, los niveles de AIB deben acercarse a cero en el momento en que las plántulas ingresan al mercado (30 días). Para poder medir el AIB en muestras de suelo, se desarrollaron anticuerpos policlonales y el correspondiente ELISA. Se criaron pollos (IgY) y conejos (IgG) y se utilizaron para evaluar los ELISA directos e indirectos. Parecía que el anticuerpo de conejo en el ELISA indirecto mostró el mejor rendimiento. Debido a los efectos de la matriz, la curva estándar se realizó en un extracto de suelo en blanco en un rango de 0-500 μg/mL. El límite de detección a 3 DE del estándar cero varió de 0,35 a 3,1 μg/mL. El anticuerpo fue altamente específico para AIB y mostró una recuperación media del 74,5% después de dos pasos de extracción consecutivos de muestras en blanco enriquecidas. Este ELISA se utilizó para monitorear el IBA en extractos de suelos de corte de 0 a 30 días después de la aplicación (día 0-1-3-8-30). Resultó que el día 8 el IBA ya era indetectable. Los resultados se confirmaron con HPLC. Se puede concluir que el ELISA para IBA desarrollado fue adecuado para analizar IBA en muestras de suelo y que las plántulas en suelo de corte tratado con IBA pueden comercializarse de acuerdo con las regulaciones de la CE.