Toxicología ambiental y analítica

TCR-Vβ8 como alternativa a las pruebas con animales para cuantificar la SEE activa

Abstract

Reuven Rasooly, Paula Do, Xiaohua He y Bradley Hernlem

La intoxicación alimentaria estafilocócica es el resultado de la ingestión de enterotoxinas estafilocócicas (SE) producidas por la bacteria Staphylococcus aureus . Las SE causan gastroenteritis y también provocan la activación de las células T y la liberación masiva de citocinas. Un método actual para la detección de SE activas se basa en su efecto emético en monos o gatitos. Sin embargo, este costoso procedimiento tiene baja sensibilidad y plantea preocupaciones éticas. Este estudio supera las limitaciones de tales bioensayos al proporcionar un método alternativo basado en la alteración de los niveles de proteína TCR Vβ8 expresados ??en la línea de células T Jurkat. Demostramos que el aumento de las concentraciones de SEE, el agente causal de los brotes transmitidos por alimentos en Francia, el Reino Unido y los EE. UU., redujo los niveles de proteína TCR Vβ8 de una manera dependiente de la dosis y, de manera similar, altera la expresión del gen de la luciferasa bajo la regulación del factor nuclear de activación de células T (NFAT). A diferencia de estudios previos que muestran que las células accesorias no son necesarias para la activación de las células T por SEA o SEB, este estudio actual demostró que las células accesorias son necesarias para la activación de las células T por SEE y que SEE tiene mayor afinidad por las células accesorias que por las células T Jurkat. Es ventajoso utilizar células muertas fijadas cuando sea posible para reducir el trabajo de cultivo celular. En este estudio demostramos que las células accesorias fijadas que carecen de cualquier función metabólica sin procesamiento pueden presentar SEE intacto y, en consecuencia, alterar los niveles de TCR Vβ8 y la expresión del gen reportero.