Revista de SIDA e investigación clínica

El daño oxidativo no contribuye de manera importante a las mutaciones mitocondriales inducidas por AZT

Abstract

Adam E Osborne, J Aquiles Sanchez, Lawrence J Wangh, Ravigadevi Sambanthamurthi y Hayes KC

La adición de niveles clínicamente relevantes de 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT) a células HepG2 cultivadas aumenta el número de especies reactivas de radicales (especies reactivas de oxígeno y nitrógeno [ROS y RNS]) así como mutaciones aleatorias en el ADN mitocondrial (ADNmt). El co-tratamiento de células expuestas a AZT con jugo de fruto de palma (PFJ) mitiga la mutagénesis de AZT . Estos hallazgos sugieren que el daño al ADNmt dependiente de AZT resultó del aumento de especies reactivas y que PFJ, un antioxidante conocido, mitigó dicho daño al disminuir los niveles de estas especies. El presente informe prueba las predicciones de que (1) PFJ mitiga la mutagénesis de AZT al reducir la carga de especies reactivas inducidas por AZT, y (2) las mutaciones inducidas por AZT en el ADNmt deberían consistir predominantemente en sustituciones G → T y C → A características del daño oxidativo del ADN. Se midieron los niveles de especies reactivas y mutagénesis mitocondrial en células HepG2 expuestas a AZT en presencia o ausencia de PFJ. Los experimentos de control mostraron que PFJ en células HepG2 exhibió una fuerte actividad depuradora contra ROS inducidas por peróxido de hidrógeno, la principal especie reactiva generada por mitocondrias disfuncionales. A pesar de esta fuerte actividad antioxidante , PFJ no disminuyó las especies reactivas inducidas por AZT a una concentración que mitigara las mutaciones de mtADN. En consonancia con esta observación, el espectro de mutaciones inducidas por AZT no se ajustó al espectro esperado del daño oxidativo directo del mtADN. En cambio, el espectro obtenido fue consistente con la mayoría de las mutaciones (80%) que surgieron de errores de la ADN polimerasa mitocondrial inducidos por AZT. Estas observaciones sugieren que el daño oxidativo no fue el principal contribuyente a las mutaciones inducidas por AZT.