Ciencia y terapia del cáncer

Inducción de óxido nítrico y TNF-α en macrófagos RAW 264.7 infectados por el virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) AF2240 y su actividad citotóxica en la línea celular de cáncer de mama MDA-MB-231

Abstract

Ismaila Ahmed, Umar Ahmad, Yong Yoke Keong, Nizar Abdu Manna y Fauziah Othman

Antecedentes: Es bien sabido que el virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) AF2240 tiene actividad antitumoral contra líneas celulares de cáncer de mama. Varios estudios han pensado que esta actividad depende de la oncólisis viral directa, que puede no ser el único factor que juega un papel en el efecto antitumoral del virus. Sin embargo, el mecanismo subyacente a su efecto antitumoral está en gran parte sin resolver. En línea con esta observación, postulamos que NDV AF2240 puede inducir una producción in vitro de óxido nítrico (NO) y factor de necrosis tumoral (TNF-α) en macrófagos RAW 264.7 para la actividad citotóxica en células de cáncer de mama.

Métodos: El virus de la enfermedad de Newcastle AF2240 se sometió a diferentes condiciones experimentales (vivo, inactivado por UV e inactivado por calor), y se cocultivaron diferentes títulos de hemaglutinación (HA) del virus con células RAW 264.7 para obtener el sobrenadante libre de células. Los niveles de TNF-α y la producción de NO se midieron mediante ELISA y ensayo de Griess respectivamente. Posteriormente se utilizó el ensayo MTT para determinar su citotoxicidad en la línea celular de cáncer de mama MDA-MB-231 in vitro.

Resultados: Se encontró que el NDV era un excelente inductor en las células de macrófagos RAW 264.7 de la producción de TNF-α (P<0,05) y NO (P<0,05) en comparación con el control negativo. También se encontró que el sobrenadante que contenía NO y TNF-α era citotóxico contra las células MDA-MB-231 (P<0,05) en comparación con el control negativo, lo que indica que la replicación viral no era necesaria para su producción, porque el NDV inactivado con UV durante 15 minutos era casi tan bueno como el NDV vivo. Sin embargo, el NDV inactivado por calor no indujo la producción de TNF-α y NO.

Conclusión: Esto sugiere la relevancia de TNF-α y NO en el efecto antitumoral indirecto de NDV AF2240, y también demuestra que el contacto directo entre los macrófagos y el NDV es suficiente para inducir la producción de TNF-α y NO en los macrófagos.