Ciencia y terapia del cáncer

El genotipo del huésped H67D afecta el crecimiento del tumor en el melanoma del ratón

Abstract

Cody Weston, William Hund, Anne Nixon, Elizabeth Neely, Becky Webb, Ahmed Alkhateeb y James Connor

Antecedentes: Investigamos los efectos del gen de alto contenido de hierro (HFE), frecuentemente polimórfico, sobre el crecimiento tumoral en un nuevo modelo de ratón. Planteamos la hipótesis de que las mutaciones del huésped en la proteína HFE modifican la progresión tumoral.

Métodos: Se inyectaron por vía subcutánea 4x106 células de la línea celular de melanoma de ratón B16F10 a ratones C57BL/6 que poseían genotipo H67D/H67D o WT/WT HFE, de 18 meses de edad. Después de 2 semanas, se sacrificaron los ratones y se recogieron los tumores y el plasma. Los métodos animales fueron aprobados por nuestro IACUC, (04-166). Los tumores se analizaron mediante RT-PCR. En paralelo, se cultivaron macrófagos derivados de médula ósea para determinar cómo reaccionan los cultivos de células B16F10 a los medios acondicionados de macrófagos de cada genotipo. Se realizaron ELISA para el contenido de ferroportina, ferritina, citocinas secretadas y quimiocinas de los medios de macrófagos. Resultados: Los ratones H67D tenían tumores significativamente más pequeños (prueba t, P = 0,02) después de dos semanas. El análisis exploratorio de tumores mediante qRT-PCR reveló que el huésped H67D puede suprimir la angiogénesis y el crecimiento. En cultivo, los macrófagos derivados de ratones H67D secretan mayores niveles de proteína quimioatrayente de monocitos 1 (MCP1), lo que sugiere un cambio en la señalización quimiotáctica (p = 0,02). Cuando se colocaron medios acondicionados de los macrófagos H67D en células B16F10 en cultivo, hubo un crecimiento significativamente menor en comparación con los medios acondicionados de macrófagos WT (p < 0,01 MTT, p < 0,01 BrdU). En lisados ??de células de macrófagos, H67D se asocia con niveles más bajos de ferroportina (p = 0,03). Conclusiones: Los macrófagos de ratones H67D no apoyan la proliferación de células tumorales tan bien como los controles WT. Nuestros datos revelan la importancia del genotipo HFE en el crecimiento tumoral que puede estar relacionado con la función de los macrófagos.