Ciencia y terapia del cáncer

Es posible que el CTCF no regule directamente la expresión del ARNm de ERα en la línea celular de cáncer de mama ER+ MCF7

Abstract

Okezie Ofor, Helen Moor, David Humber y Christina Greenwood

Introducción: CTCF es un factor proteico de 11 dedos de zinc conservado evolutivamente que participa en una serie de procesos cuya desregulación podría conducir a la transformación celular. A través de interacciones con regiones de unión de ERα y genes regulados por ER, se demostró que CTCF compartimenta el genoma celular en dominios. También se colocaliza con ERα en células MCF7 y tuvo interacciones con ERα durante el reclutamiento de la histona desacetilasa y la actividad de la cabeza de horquilla. Anteriormente se demostró que una isoforma de ejecución rápida se expresaba en el tejido de cáncer de mama, pero no en el tejido mamario normal. No está claro si existe una relación reguladora entre CTCF y ERα en el cáncer de mama.
Objetivo: Determinar si la expresión de CTCF regulaba la expresión de ERα en la línea celular de cáncer de mama ER+ MCF7.
Métodos: Las células de cáncer de mama MCF7 se transfectaron con vectores de expresión de CTCF o ARNi contra CTCF. Tras la sobreexpresión y la inhibición de CTCF, los cambios en la expresión endógena del gen ERα y la expresión de la proteína se monitorearon mediante la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (utilizando las pautas MIQE) y el análisis de transferencia Western respectivamente.
Resultados: La sobreexpresión del plásmido CTCF y la inhibición de siRNA se asociaron con el redondeo celular, pero con una viabilidad celular del 96,4% y el 95,7% respectivamente. El aumento del ARNm de CTCF en la sobreexpresión se asoció con un aumento en la expresión de la proteína CTCF. La inhibición de siRNA del ARNm de CTCF estuvo acompañada por una disminución correspondiente en la expresión de la proteína CTCF. La sobreexpresión y la inhibición de CTCF parecieron inhibir la capacidad de detectar la expresión de la proteína ERα mediante transferencia Western. Ni la sobreexpresión ni la inhibición de CTCF alteraron la expresión del ARNm de ERα detectada por QPCR.
Conclusión: Las alteraciones en la expresión del ARNm de CTCF no afectaron la expresión del gen ERα en las células MCF7, lo que sugiere que las interacciones de CTCF con el receptor de estrógeno en el cáncer de mama pueden no estar mediadas por la regulación directa de la expresión del ARNm de ERα.